Pemeriksaan Enzim SGPT/Alat

Pemeriksaan Enzim SGPT/Alat

       I.            Metode          

Kinetik – IFCC

    II.            Tujuan          

Mengetahui cara pemeriksaan SGPT dan mengetahui aktivitas SGPT dalam serum yang diperiksa.

 III.            Prinsip reaksi

L – alanin + 2-Oxoglutarat L- Glutamate + Pyurufate

Pyurufate+NADH+H D- Laktate = NAD

 IV.            Dasar teori

SGPT atau juga dinamakan ALT (alanin aminotransferase) merupakan enzim yang banyak ditemukan pada sel hati serta efektif unruk mendiagnosis destruksi hepatoseluler. Enzim ini dalam jumlah yang kecil dijumpai pada otot jantung, ginjal dan otot rangka. Pada umumnya nilai tes SGPT/ALT lebih tinggi daripada SGOT/AST pada kerusakan parenkim hati akut, sedangkan pada proses kronis di dapat sebaliknya.

SGPT/ALT serum umunya diperiksa secara fotometri atau spektrofotometri, secara semi otomatis dan otomatis.

    V.            Peralatan

1.      Kuvet

2.      Cllinipet 100µl , 1000 µl

3.      Tip kuning dan tip biru

4.      Spektrofotometer

 VI.            Bahan

Serum

VII.            Reagensia

1.      Reagen 1 :

·         THS pH 7,15                                                                     140 mmol/L

·         L-alanine                                                                           700mmol/L

·         LDH (Lactate dehydrogenase)                                         ≥2300 U/L

2.      Reagen 2

·         NADH                                                                              1 mmol

·         2-oxoglutarat                                                                     85 mmol

Dari ragen 1 dan 2 dibuat monoreagen dengan perbandingan 4 bagian reagen 1 ditambah 1 bagian reagen 2.

VIII.            Cara kerja

-          Masukkan ke dalam tabung reaksi

	Blanko	Pemeriksaan
Reagen	-	1000µl
Serum	-	100 µl

-          Campur dibaca dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 340 nm dengan faktor 1745.

-          Pembacaan dilakukan pada menit 1, 2 , dan 3

-          Catat hasil pemeriksaan dalam buku.

 IX.            Hasil dan perhitungan

Menit                           absorban sampel

1                                                                    1,005

2                                                                    0,989

3                                                                    0,969

Perhitungan

 menit =  = =0,026

Aktivitas enzim SGPT            = menit ×faktor

                                    = 0,026 × 3235

                                    =84 U/L

    X.            Kesimpulan

Dari praktikum yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa praktikan dapat mengetahui cara pemeriksaan aktivitas enzim SGPT/ALT dan hasil pemeriksaan serum adalah 84 U/L