Pemeriksaan enzim SGOT/ASAT

Pemeriksaan Enzim SGOT/ASAT

              

Metode          

Kinetik – IFCC

    II.            Tujuan          

Mengetahui cara pemeriksaan SGOT dan mengetahui aktivitas SGOT dalam serum yang diperiksa.

 III.            Prinsip reaksi

L – Aspartate + 2 –Oxoglutarate  L- Glutamate + Oxaloacetate

Oxoloacetate + NADH + H⁺ -^MDH L- Malate + NAD⁺

 IV.            Dasar Teori

SGOT atau juga dinamakan AST (Aspartat aminotransferase) merupakan enzim yang dijumpai dalam otot jantung, hati, semntara dalam konsentrasi sedang dijumpai pada otot rangka, ginjal , dan pankreas. Konsentrasi rendah dijumpai dalam darah, kecuali jika terjadi cedera seluler, kemudian dalam jumlah banyak dilepaskan ke dalam sirkulasi. Pada infark jantung, SGOT/ASAT akan meningkat setelah 10 jam dan mencapai puncaknya 24-48 setelah terjadinya infark. SGOT/AST akan normal kembali setelah 4-6 hari jika tidak terjadi infark tambahan. Pada penyakit hati, kadarnya akan meningkat 10 kali lebih dan akan tetap demikian dalam waktu yang lama.

    V.            Peralatan

1.      Kuvet

2.      Clinipet 100 µl, 1000 µl,

3.      Tip kuning dan tip biru

4.      Spektrofometer

 VI.            Bahan

Serum

VII.            Reagensia

1.      Reagen 1 :

·         THS pH 7,15                                                                     80 mmol/L

·         L-aspartate                                                                                    240mmol/L

·         MDH                                                                                 ≥600 U/L

·         LDH                                                                                  ≥900 U/L

2.      Reagen 2

·         NADH                                                                              0,18 mmol

·         2-oxoglutarat                                                                     12 mmol

Dari ragen 1 dan 2 dibuat monoreagen dengan perbandingan 4 bagian reagen 1 ditambah 1 bagian reagen 2.

VIII.            Cara Kerja

-          Masukkan ke dalam tabung reaksi

	Blanko	Pemeriksaan
Reagen	-	1000µl
Serum	-	100 µl

-          Campur dibaca dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 340 nm dengan faktor 1745.

-          Pembacaan dilakukan pada menit 1, 2 , dan 3

-          Catat hasil pemeriksaan dalam buku.

 IX.            Hasil dan perhitungan

Menit                           absorban sampel

1                                                                    0,889 A

2                                                                    0,880 A

3                                                                    0,873 A

Perhitungan

 menit =  = =0,008 A

Aktivitas enzim SGOT= menit ×faktor

                                    = 0,008 × 3235

                                    =26 U/L

    X.            Kesimpulan

Dari praktikum yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa praktikan dapat mengetahui cara pemeriksaan aktivitas enzim SGOT/ASAT dan hasil pemeriksaan serum adalah 26 U/L